TBI uses forensic intelligence from the forensic drug chemistry unit to implement nitazene screening method in the forensic toxicology unit.

Tennessee’s Bureau of Investigation (TBI) forensic drug chemistry unit confirmed its first case with nitazenes in late 2019. From January 2021 to December 2023 the forensic drug chemistry unit reported 344 cases positive for nitazenes. 227 of these cases (66%) reported one or more additional drugs in the sample, fentanyl and heroin were the most common. With no screening kit for nitazene compounds in the forensic toxicology unit realized a large number of nitazene cases were potentially being missed. Since nitazenes were commonly identified with fentanyl, the toxicology unit altered its opiate/fentanyl LC-MS/MS confirmation method to monitor isotonitazene and metonitazene ions.

Samples were confirmed for opiates and fentanyl while simultaneously being screened for nitazenes. 500 µL of sample was spiked with internal standard and diluted with 3 mL of phosphate buffer before being centrifuged for 10 minutes. Samples were directly loaded on UCT’s Clean Screen Xcel I SPE column before being washed with 3 mL of ionized water and 3 mL of 2% acetic acid in methanol. SPE columns were dried for 10 minutes before analytes were eluted with 3 mL of DCM:IPA:NH₄OH (78:20:2). Samples were evaporated and reconstituted before being injected on a Sciex 3200 Qtrap. Samples that screened positive for isotonitazene and/or metonitazene were outsourced on a case-by-case basis.

Between 2021 and December 2023, 206 samples were presumptively positive for isotonitazene and metonitazene. 203 of these cases (98.5%) were positive for additional drugs. Fentanyl and methamphetamine were the most common which is consistent with data found by the forensic drug chemistry unit. This study shows the importance of cross-unit communication, especially when battling the ever-changing market of novel psychoactive substances. The data collected also demonstrates a need for TBI’s forensic toxicology unit to implement a confirmation method for nitazenes, all presumptively positive cases could not be outsourced due to budget reasons. The confirmation method should include the new .nitazene analogs and metabolites that have been discerned by research.

واحد شیمی دارویی جنایی اداره تحقیقات تنسی (TBI) اولین مورد از نیتازن‌ها را در اواخر سال 2019 تأیید کرد. از ژانویه 2021 تا دسامبر 2023، این واحد 344 مورد مثبت برای نیتازن‌ها گزارش کرد. در 227 مورد از این نمونه‌ها (66%)، یک یا چند داروی دیگر نیز شناسایی شد که فنتانیل و هروئین رایج‌ترین آنها بودند. به دلیل عدم وجود کیت غربالگری برای ترکیبات نیتازن در واحد سم‌شناسی جنایی، احتمال داده شد که تعداد زیادی از موارد نیتازن ممکن است شناسایی نشده باشند. از آنجا که نیتازن‌ها معمولاً همراه با فنتانیل شناسایی می‌شدند، واحد سم‌شناسی روش تأیید فنتانیل/افیون LC-MS/MS خود را به‌گونه‌ای تغییر داد که یون‌های ایزوتونیتازن و متونیتازن را نیز تحت نظر داشته باشد.

نمونه‌ها برای افیون‌ها و فنتانیل تأیید شده و همزمان برای نیتازن‌ها غربالگری شدند. 500 میکرولیتر از نمونه با استاندارد داخلی ترکیب و با 3 میلی‌لیتر بافر فسفات رقیق شد، سپس برای 10 دقیقه سانتریفیوژ شد. نمونه‌ها به طور مستقیم بر روی ستون SPE Clean Screen Xcel I شرکت UCT بارگذاری شده و سپس با 3 میلی‌لیتر آب یونیزه و 3 میلی‌لیتر اسید استیک 2% در متانول شسته شدند. ستون‌های SPE برای 10 دقیقه خشک شدند و آنالیت‌ها با 3 میلی‌لیتر DCM:IPA
(78:20:2) خارج شدند. نمونه‌ها تبخیر و دوباره بازترکیب شدند و سپس بر روی دستگاه Sciex 3200 Qtrap تزریق شدند. نمونه‌هایی که در غربالگری ایزوتونیتازن و/یا متونیتازن مثبت شدند، به صورت موردی به خارج از مرکز ارسال شدند.

بین سال‌های 2021 و دسامبر 2023، 206 نمونه به صورت فرضی برای ایزوتونیتازن و متونیتازن مثبت بودند. 203 مورد از این نمونه‌ها (98.5%) حاوی داروهای اضافی بودند. فنتانیل و متامفتامین رایج‌ترین آنها بودند که با داده‌های واحد شیمی دارویی جنایی همخوانی دارد. این مطالعه نشان می‌دهد که ارتباط بین واحدهای مختلف بسیار مهم است، به ویژه در مقابله با بازار در حال تغییر مواد روان‌گردان جدید. همچنین داده‌های جمع‌آوری شده نشان‌دهنده نیاز واحد سم‌شناسی جنایی TBI به پیاده‌سازی روش تأیید نیتازن‌ها است، چرا که به دلیل مشکلات بودجه، تمام نمونه‌های فرضی مثبت نمی‌توانستند به خارج از مرکز ارسال شوند. روش تأیید باید شامل آنالوگ‌ها و متابولیت‌های جدید نیتازن باشد که توسط تحقیقات شناسایی شده‌اند.